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赵月, 林洁华*
(青岛科技大学 化学与分子工程学院, 山东 青岛266042)
摘要:研制了一种基于异硫氰酸荧光素(FITC)标记荧光抗体修饰介孔SiO2的超灵敏标记探针,并成功用于检测人血清中甲胎蛋白(AFP)的含量。通过EDC/NHS交联剂将FITC标记抗体固定在氨基功能化的介孔SBA-15上,制备得到抗体修饰介孔SBA-15的信号放大型荧光免疫探针(FITC-Ab*/SBA-15)。将AFP单克隆抗体固定在纳米金/介孔SBA-15修饰的玻璃片上,然后植入流动注射体系,构建免疫检测流通池。基于夹心式免疫反应模式,结合流动注射分析技术,待测抗原与FITC-Ab*/SBA-15顺序注射到免疫流通池。免疫反应结束后,FITC-Ab*/SBA-15被引入到流通池的玻璃载体表面,进行荧光检测。介孔SBA-15纳米粒子由于具有较大的比表面积和交错的多维孔道,可以大大提高生物分子的的负载量,使得在每个微球上能够负载更多的FITC标记二抗,使荧光信号得到放大,拓宽了检测的线性范围。
关键词:甲胎蛋白; 荧光免疫分析; 流动注射; 夹心免疫反应; 介孔SBA-15
中图分类号: O 657.3 文献标志码: A
Preparation of Signal-amplifying Fluorescent Immune Probe Based on Antibody-modified Mesoporous SBA-15
ZHAO Yue,LIN Jie-hua
(College of Chemistry and Molecular Engineering,Qingdao University of Science and Technology,Qingdao 266042,China)
收稿日期: 2010-11-26
基金项目:国家自然科学基金项目(20775038);山东省自然科学基金项目(Q2007803).
作者简介:赵月(1987—), 女, 硕士研究生.*通信联系人.